La micromanipulation de la pipette guide l’extension (> 250 μm) du nouveau filament de la première population neuronale à travers l’espace vide et induit la formation d’une connexion avec la deuxième population neuronale.

 

Connexion de deux populations neuronales isolées à l’aide du dispositif de co-culture.

(a) Dispositif de co-culture (bleu) assemblé sur une lamelle de verre pour faire pousser quatre populations neuronales isolées sur une même lamelle.

(b) Après 14 jours de culture, le dispositif de co-culture a été retiré, exposant l’espace de 200 um entre les populations neuronales.

(c) Représentation schématique de la configuration expérimentale montrant un zoom sur l’espace entre deux populations neuronales isolées (population une au-dessus et population deux en-dessous) ainsi que la position des deux pointes de pipette.

(d) En appliquant une pression négative à une pipette, une bille recouverte de PDL adhérant à la population neuronale est tirée avec l’embout de la pipette, initiant ainsi un nouveau filament. En maintenant la pression négative dans la pipette, le complexe Bille-nouveau filament (vert) peut être tiré pour permettre l’allongement du filament.

(e) La micromanipulation des pipettes guide l’extension (> 250 μm) du nouveau filament à travers l’intervalle et la formation d’une connexion avec la population neuronale deux. Pour assurer l’adhésion du nouveau filament à la population neuronale deux, une bille PDL (rouge) est positionnée (avec une deuxième pipette) sur le filament étendu et la population neuronale deux. L’image montre deux filaments nouvellement induits guidés par micromanipulation pour relier deux populations neuronales précédemment isolées en moins de 2 h.

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